非洲马瘟病毒RT-LAMP检测方法的建立

作者: 姜睿姣 [1] 邬旭龙 [1] 张鹏飞 [1] 王印 [2] 杨泽晓 [2] 姚学萍 [2]

关键词: 非洲马瘟病毒环介导等温扩增检测

摘要：为了建立非洲马瘟病毒(AHSV)环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测方法,基于AHSV VP7基因保守序列,设计2对特异性扩增引物.通过对反应体系中各组分浓度,反应温度及时间的优化,建立了快速、灵敏的AHSV RT-LAMP检测方法,并对该方法特异性、灵敏性、重复性进行探索.结果表明,在63℃恒温下反应45 min,便可进行高效率的特异性扩增.反应产物经琼脂糖凝胶电泳和染料可视化鉴定,能够快速有效检测AHSV.用建立的方法检测马属动物易感的4种疫病病原,结果均为阴性,证实具有较高的特异性.灵敏性是RT-PCR的1000倍.建立了AHSV RT-LAMP检测方法,具有快速、特异、灵敏、操作简单、设备要求低的特点,适合用于现场A H SV快速检测.

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非洲马瘟病毒RT-LAMP检测方法的建立

作者: 姜睿姣 [1] 邬旭龙 [1] 张鹏飞 [1] 王印 [2] 杨泽晓 [2] 姚学萍 [2]

关键词: 非洲马瘟病毒 环介导等温扩增 检测

关键词: 非洲马瘟病毒环介导等温扩增检测