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MMP13和TIMP2在肝缺血再灌注损伤介导肝纤维化进程中的动态变化及作用
作者:左嘉玮 屈豫花 赵辰怡 张露文 陈雅楠 杨洋 秦燕
关键词: 肝缺血再灌注损伤; 肝纤维化; 基质金属蛋白酶13; 基质金属蛋白酶组织抑制因子2;
摘要：探讨肝缺血再灌注损伤（HIRI）介导肝纤维化进程中基质金属蛋白酶-13（MMP13）和基质金属蛋白酶组织抑制剂2（TIMP2）的动态变化及作用。将70只C57雄性小鼠随机分为假手术组（Sham组）及肝缺血再灌注组（I/R 0 h组、I/R 3 h组、I/R 6 h组、I/R 72 h组、I/R 7 d组及I/R 15 d组）。夹闭肝门静脉、左叶和中叶的肝动脉,缺血90 min后开夹,分别再灌0、3、6、72 h、7 d及15 d,处死小鼠。检测小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）的水平;测定肝组织中羟脯氨酸（Hyp）的含量;免疫组化法检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达量;RT-PCR检测肝组织MMP13和TIMP2 mRNA的表达水平;HE染色观察肝纤维化程度。结果显示,与Sham组相比,I/R 0 h、I/R 3 h及I/R 6 h组血清ALT、AST升高（P<0.05）,I/R 72 h、I/R 7 d及I/R 15 d组下降（P<0.05）。I/R各组肝组织Hyp含量随再灌注时间延长逐渐升高,其中I/R 72 h、I/R 7 d、I/R 15 d组显著高于Sham组（P<0.05）。免疫组化显示,肝组织α-SMA的蛋白表达量随再灌注时间延长而逐渐增加。RT-PCR显示,I/R各组MMP13 mRNA的表达水平呈先高后低的趋势,与Sham组相比,I/R 0 h、I/R 3 h组显著升高（P<0.05）。而TIMP2的表达为先低后高,与Sham组相比,I/R 72 h、I/R 7 d及I/R 15 d组显著升高（P<0.05）。HE染色结果与上述变化趋势相一致。结果表明,在HIRI介导肝纤维化形成过程中MMP13与TIMP2呈动态的协同作用,共同促进肝纤维化的发生发展,是肝纤维化形成的关键因素。